介紹如何在 Python 中使用 ITK 函式庫計算 3D 二元遮罩影像中的物件數量與體積。
讀取原始影像
載入原始的 3D 細胞影像:
import itk import itkwidgets # 載入影像 image = itk.imread("3d_monolayer_xy1_ch2.tif") # 查看影像 itkwidgets.view(image)
這裡所使用的 3D 細胞影像可以從 CellProfiler 的 GitHub 網站上取得。
產生遮罩影像
使用 BinaryThresholdImageFilter
以門檻值方式產生遮罩影像:
# 以門檻值方式產生遮罩影像 binFilter = itk.BinaryThresholdImageFilter[ImageType, ImageType].New() # 設定門檻值 binFilter.SetLowerThreshold(110) binFilter.SetUpperThreshold(255) binFilter.SetInsideValue(255) binFilter.SetOutsideValue(0) binFilter.SetInput(image) binFilter.Update() # 查看影像 itkwidgets.view(binFilter.GetOutput())
產生物件標註影像
使用 ConnectedComponentImageFilter
將二元影像遮罩轉為物件標註:
# 產生物件標註影像 ccFilter = itk.ConnectedComponentImageFilter[ImageType, CCImageType].New() ccFilter.SetInput(binFilter.GetOutput()) # 只計算局部區域時可用遮罩控制 #ccFilter.SetMaskImage(anotherMaskImage) # 計算寬度為 1 像素大小的物件時,需要啟用 Fully Connected 選項 #ccFilter.SetFullyConnected(True) ccFilter.Update() # 查看影像 itkwidgets.view(ccFilter.GetOutput())
查看所有物件的數量:
# 物件數量 print("Object Count:", ccFilter.GetObjectCount())
Object Count: 4320
由於影像中有許多雜訊都會被判定為獨立的物件,因此在初步的處理結果中,物件的數量會遠大於實際的物件數量,必須再進一步處理。
保留前 N 個最大的物件
LabelShapeKeepNObjectsImageFilter
可以根據各種物件的屬性(預設是像素數),取出前 N 個最大的物件:
# 保留前 N 個最大的物件 keepNObjFilter = itk.LabelShapeKeepNObjectsImageFilter[CCImageType].New() keepNObjFilter.SetInput(ccFilter.GetOutput()) keepNObjFilter.SetBackgroundValue(0) # 保留前 20 個最大的物件 keepNObjFilter.SetNumberOfObjects(20) # 根據物件的像素數量排序(NUMBER_OF_PIXELS = 100) keepNObjFilter.SetAttribute(100) keepNObjFilter.Update() # 查看影像 itkwidgets.view(keepNObjFilter.GetOutput())
依照物件大小重新編排標註
另一種常見的後處理方式是使用 RelabelComponentImageFilter
依照物件大小重新編排物件標註,並且排除太小的物件:
# 依照物件大小重新編排物件標註 relabelFilter = itk.RelabelComponentImageFilter[CCImageType, CCImageType].New() relabelFilter.SetInput(ccFilter.GetOutput()) # 設定物件的最低像素數 relabelFilter.SetMinimumObjectSize(1000) relabelFilter.Update() # 物件數量 print("Number of Object:", relabelFilter.GetNumberOfObjects())
Number of Object: 18
列出重新編排後的所有物件:
# 列出所有物件的大小 for i in range(1, relabelFilter.GetNumberOfObjects()+1): print("Label {}: Size = {}".format(i, relabelFilter.GetSizeOfObjectInPixels(i)))
Label 1: Size = 96923 Label 2: Size = 87725 Label 3: Size = 44710 Label 4: Size = 44152 Label 5: Size = 44129 Label 6: Size = 42240 Label 7: Size = 39144 Label 8: Size = 36027 Label 9: Size = 33964 Label 10: Size = 32491 Label 11: Size = 31588 Label 12: Size = 30674 Label 13: Size = 29314 Label 14: Size = 21026 Label 15: Size = 12549 Label 16: Size = 4779 Label 17: Size = 3656 Label 18: Size = 2733
這裡透過 GetSizeOfObjectInPixels
所取得的體積其單位是 voxel,若要獲取物件實際的體積,可以改用 GetSizeOfObjectInPhysicalUnits
。
串流處理
對於大型影像,可以使用 StreamingImageFilter 串流分批處理的方式處理。
import itk import itkwidgets PixelType = itk.UC Dimension = 3 ImageType = itk.Image[PixelType, Dimension] CCImageType = itk.Image[itk.US, Dimension] # 載入影像 imageFilename = "3d_monolayer_xy1_ch2.tif" reader = itk.ImageFileReader[ImageType].New(FileName=imageFilename) # 以門檻值方式產生遮罩影像 binFilter = itk.BinaryThresholdImageFilter[ImageType, ImageType].New() binFilter.SetLowerThreshold(110) binFilter.SetUpperThreshold(255) binFilter.SetInsideValue(255) binFilter.SetOutsideValue(0) binFilter.SetInput(reader.GetOutput()) # 產生物件標註影像 ccFilter = itk.ConnectedComponentImageFilter[ImageType, CCImageType].New() ccFilter.SetInput(binFilter.GetOutput()) # 依照物件大小重新編排物件標註 relabelFilter = itk.RelabelComponentImageFilter[CCImageType, CCImageType].New() relabelFilter.SetInput(ccFilter.GetOutput()) relabelFilter.SetMinimumObjectSize(1000) # 設定分割數量 numberOfSplits = 4 # 建立 PipelineMonitorImageFilter 查看 Streaming 每次處理的範圍 monitorFilter = itk.PipelineMonitorImageFilter[CCImageType].New() monitorFilter.SetInput(relabelFilter.GetOutput()) # 建立 StreamingImageFilter 將資料以 Streaming 分批處理 streamingFilter = itk.StreamingImageFilter[CCImageType, CCImageType].New() streamingFilter.SetInput(monitorFilter.GetOutput()) streamingFilter.SetNumberOfStreamDivisions(numberOfSplits) # 實際執行 streamingFilter.Update() # 輸出影像完整的 Region 資訊 print('The output LargestPossibleRegion is: ' + str(streamingFilter.GetOutput().GetLargestPossibleRegion())) # 輸出 Streaming 的分批 Region 資訊 updatedRequestedRegions = monitorFilter.GetUpdatedRequestedRegions() print("Updated RequestedRegion's:") for r in range(len(updatedRequestedRegions)): print(' ' + str(updatedRequestedRegions[r]))
The output LargestPossibleRegion is: itkImageRegion3([0, 0, 0], [256, 256, 60]) Updated RequestedRegion's: itkImageRegion3([0, 0, 0], [256, 256, 15]) itkImageRegion3([0, 0, 15], [256, 256, 15]) itkImageRegion3([0, 0, 30], [256, 256, 15]) itkImageRegion3([0, 0, 45], [256, 256, 15])
# 物件數量 print("Number of Object:", relabelFilter.GetNumberOfObjects())
Number of Object: 18
# 列出所有物件的大小 for i in range(1, relabelFilter.GetNumberOfObjects()+1): print("Label {}: Size = {}".format(i, relabelFilter.GetSizeOfObjectInPixels(i)))
Label 1: Size = 96923 Label 2: Size = 87725 Label 3: Size = 44710 Label 4: Size = 44152 Label 5: Size = 44129 Label 6: Size = 42240 Label 7: Size = 39144 Label 8: Size = 36027 Label 9: Size = 33964 Label 10: Size = 32491 Label 11: Size = 31588 Label 12: Size = 30674 Label 13: Size = 29314 Label 14: Size = 21026 Label 15: Size = 12549 Label 16: Size = 4779 Label 17: Size = 3656 Label 18: Size = 2733